公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范

《公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》由衛(wèi)生部于2012年9月19日衛(wèi)通〔2012〕16號(hào)發(fā)布，自2013年4月1日起實(shí)施。衛(wèi)生部于2006年發(fā)布的《公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》自2013年4月1日起廢止。

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部批準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)負(fù)責(zé)起草單位：中國(guó)疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所、江蘇省疾病預(yù)防控制中心、深圳市疾病預(yù)防控制中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：姚孝元、金銀龍、劉凡、王俊起、戴自祝、張秀珍、于淑苑、孫波、金鑫、王艷、朱文玲、韓旭。

公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范

1 范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)(以下簡(jiǎn)稱集中空調(diào)系統(tǒng))的設(shè)計(jì)、質(zhì)量、檢驗(yàn)和管理等衛(wèi)生要求。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于公共場(chǎng)所使用的集中空調(diào)系統(tǒng)，其他場(chǎng)所集中空調(diào)系統(tǒng)可參照?qǐng)?zhí)行。

2 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

2.1 新風(fēng)量 air change flow

單位時(shí)間內(nèi)由集中空調(diào)系統(tǒng)進(jìn)入室內(nèi)的室外空氣的量，單位為m3/(h·人)。

2.2 可吸入顆粒物 inhalable particle matter

懸浮在空氣中，空氣動(dòng)力學(xué)當(dāng)量直徑小于等于10 μm，能夠進(jìn)入人體喉部以下呼吸道的顆粒狀物質(zhì)，簡(jiǎn)稱PM10。

2.3 風(fēng)管表面積塵量 duct surface dust

集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面單位面積灰塵的量，單位為g/m2。

3 設(shè)計(jì)衛(wèi)生要求

3.1 集中空調(diào)系統(tǒng)新風(fēng)量的設(shè)計(jì)應(yīng)符合表1的要求。

表1 新風(fēng)量要求

3.2  集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)溫度的設(shè)計(jì)宜使公共浴室的更衣室、休息室冬季室內(nèi)溫度達(dá)到25℃，其他公共場(chǎng)所在16℃～20℃之間;夏季室內(nèi)溫度在26℃～28℃之間。

3.3集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)濕度的設(shè)計(jì)宜使游泳場(chǎng)(館)相對(duì)濕度不大于80%，其他公共場(chǎng)所相對(duì)溫度在40%～65%之間。

3.4 集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)風(fēng)速的設(shè)計(jì)宜使賓館、旅店、招待所、咖啡館、酒吧、茶座、理發(fā)店、美容店及公共浴室的更衣室、休息室風(fēng)速不大于0.3  m/s。其他公共場(chǎng)所風(fēng)速不大于0.5 m/s。

3.5 對(duì)有睡眠、休憩需求的公共場(chǎng)所，集中空調(diào)系統(tǒng)運(yùn)行所產(chǎn)生的噪聲對(duì)場(chǎng)所室內(nèi)環(huán)境造成的影響不得高于設(shè)備設(shè)施關(guān)閉狀態(tài)時(shí)室內(nèi)環(huán)境噪聲值5  dB(A計(jì)權(quán))。

3.6 集中空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)具備下列設(shè)施：

a) 應(yīng)急關(guān)閉回風(fēng)和新風(fēng)的裝置;

b) 控制空調(diào)系統(tǒng)分區(qū)域運(yùn)行的裝置;

c) 供風(fēng)管系統(tǒng)清洗、消毒用的可開閉窗口，或便于拆卸的不小于300 mm×250 mm的風(fēng)口。

3.7 集中空調(diào)系統(tǒng)宜設(shè)置去除送風(fēng)中微生物、顆粒物和氣態(tài)污染物的空氣凈化消毒裝置。

3.8 集中空調(diào)系統(tǒng)的新風(fēng)應(yīng)直接取自室外，不應(yīng)從機(jī)房、樓道及天棚吊頂?shù)忍庨g接吸取新風(fēng)。

3.9 集中空調(diào)系統(tǒng)的新風(fēng)口應(yīng)設(shè)置防護(hù)網(wǎng)和初效過(guò)濾器，并符合以下要求：

a) 設(shè)置在室外空氣清潔的地點(diǎn)，遠(yuǎn)離開放式冷卻塔和其他污染源;

b) 低于排風(fēng)口;

c) 進(jìn)風(fēng)口的下緣距室外地坪不宜小于2m，當(dāng)設(shè)在綠化地帶時(shí)，不宜小于1 m;

d) 進(jìn)排風(fēng)不應(yīng)短路。

3.10 集中空調(diào)系統(tǒng)的送風(fēng)口和回風(fēng)口應(yīng)設(shè)置防蟲媒裝置，設(shè)備冷凝水管道應(yīng)設(shè)置水封。

3.11 集中空調(diào)系統(tǒng)加濕方式宜選用蒸汽加濕，選用自來(lái)水噴霧或冷水蒸發(fā)的加濕方式應(yīng)有控制軍團(tuán)菌繁殖措施，

3. 12 集中空調(diào)系統(tǒng)開放式冷卻塔應(yīng)符合下列要求：

a)開放式冷卻塔的設(shè)置應(yīng)遠(yuǎn)離人員聚集區(qū)域、建筑物新風(fēng)取風(fēng)口或自然通風(fēng)口，不應(yīng)設(shè)置在新風(fēng)口的上風(fēng)向，宜設(shè)置冷卻水系統(tǒng)持續(xù)消毒裝置;

b)開放式冷卻塔應(yīng)設(shè)置有效的除霧器和加注消毒劑的入口;

c)開放式冷卻塔水池內(nèi)側(cè)應(yīng)平滑，排水口應(yīng)設(shè)在塔池的底部。

3.13  集中空調(diào)系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面應(yīng)當(dāng)光滑，易于清理。制作風(fēng)管的材料不得釋放有毒有害物質(zhì)，宜使用耐腐蝕的金屬材料;采用非金屬材料制作風(fēng)管時(shí)，必須保證風(fēng)管的堅(jiān)固及嚴(yán)密性，具有承受機(jī)械清洗設(shè)備工作沖擊的強(qiáng)度。

4 衛(wèi)生質(zhì)量要求

4.1 集中空調(diào)系統(tǒng)新風(fēng)量應(yīng)符合表1的要求。

4.2 集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水和冷凝水中不得檢出嗜肺軍團(tuán)菌。

4.3 集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)質(zhì)量應(yīng)符合表2的要求。

表2送風(fēng)衛(wèi)生指標(biāo)

4.4 集中空凋系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面衛(wèi)生指標(biāo)應(yīng)符合表3的要求。

表3風(fēng)管內(nèi)表面衛(wèi)生指標(biāo)

5 衛(wèi)生管理要求

5.1 應(yīng)建立集中空調(diào)系統(tǒng)衛(wèi)生檔案，主要包括以下內(nèi)容：

a) 集中空調(diào)系統(tǒng)竣工圖;

b) 衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)或評(píng)價(jià)報(bào)告書;

c) 經(jīng)常性衛(wèi)生檢查及維護(hù)記錄;

d) 清洗、消毒及其資料記錄;

e) 空調(diào)故障、事故及其他特殊情況記錄。

5.2 應(yīng)定期對(duì)集中空調(diào)系統(tǒng)進(jìn)行檢查、檢測(cè)和維護(hù)。

5.3 應(yīng)定期對(duì)集中空調(diào)系統(tǒng)下列部位進(jìn)行清洗：

a) 開放式冷卻塔每年清洗不少于一次;

b) 空氣凈化過(guò)濾材料應(yīng)當(dāng)每六個(gè)月清洗或更換一次;

c) 空氣處理機(jī)組、表冷器、加熱(濕)器、冷凝水盤等每年清洗一次。

5.4 集中空調(diào)系統(tǒng)出現(xiàn)下列情況時(shí)，應(yīng)對(duì)相關(guān)部位進(jìn)行清洗消毒：

a) 冷卻水、冷凝水中檢出嗜肺軍團(tuán)菌;

b) 送風(fēng)質(zhì)量不符合表2要求的;

c) 風(fēng)管內(nèi)表面積塵量、細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)有不符合表3要求的。

5.5 應(yīng)制定集中空調(diào)系統(tǒng)預(yù)防空氣傳播性疾病的應(yīng)急預(yù)案，主要包括以下內(nèi)容：

a) 集中空調(diào)系統(tǒng)進(jìn)行應(yīng)急處理的責(zé)任人;

b) 不同送風(fēng)區(qū)域隔離控制措施、最大新風(fēng)量或全新風(fēng)運(yùn)行方案、空調(diào)系統(tǒng)的清洗、消毒方法等;

c) 集中空調(diào)系統(tǒng)停用后應(yīng)采取的其他通風(fēng)與調(diào)溫措施等。

5.6 當(dāng)空氣傳播性疾病暴發(fā)流行時(shí)，符合下列條件之一的集中空調(diào)系統(tǒng)方可繼續(xù)運(yùn)行：

a) 采用全新風(fēng)方式運(yùn)行的;

b) 裝有空氣凈化消毒裝置，并保證該裝置有效運(yùn)行的;

c) 風(fēng)機(jī)盤管加新風(fēng)的空調(diào)系統(tǒng)，能確保各房間獨(dú)立通風(fēng)的。

5.7  當(dāng)空氣傳播性疾病暴發(fā)流行時(shí)，應(yīng)每周對(duì)運(yùn)行的集中空調(diào)系統(tǒng)的開放式冷卻塔、過(guò)濾網(wǎng)、過(guò)濾器、凈化器、風(fēng)口、空氣處理機(jī)組、表冷器、加熱(濕)器、冷凝水盤等設(shè)備或部件進(jìn)行清洗、消毒或者更換。

6 衛(wèi)生檢測(cè)要求

6.1 檢測(cè)樣本量

6.1.1 抽樣比例不應(yīng)少于空氣處理機(jī)組對(duì)應(yīng)的風(fēng)管系統(tǒng)總數(shù)量的5%;不同類型的集中空調(diào)系統(tǒng).每類至少抽1套。

6.1.2 每套應(yīng)選擇2個(gè)～5個(gè)代表性部位。

6.1.3 集中空調(diào)系統(tǒng)的冷卻水和冷凝水分別不應(yīng)少于1個(gè)部位。

6.2 檢驗(yàn)方法

6.2.1 集中空調(diào)系統(tǒng)新風(fēng)量檢測(cè)方法見附錄A。

6.2.2 集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團(tuán)菌檢驗(yàn)方法見附錄B。

6.2.3 集中空調(diào)送風(fēng)中可吸入顆粒物檢測(cè)方法見附錄C。

6.2.4 集中空調(diào)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)方法見附錄D。

6.2.5 集中空調(diào)送風(fēng)中真菌總數(shù)檢驗(yàn)方法見附錄E。

6.2.6 集中空調(diào)送風(fēng)中β一溶血性鏈球菌檢驗(yàn)方法見附錄F。

6.2.7 集中空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團(tuán)菌檢驗(yàn)方法見附錄G。

6.2.8 集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面積塵量檢驗(yàn)方法見附錄H。

6.2.9 集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物檢驗(yàn)方法見附錄I。

6.3 檢驗(yàn)結(jié)果判定

當(dāng)檢測(cè)結(jié)果為下列情況之一的，判定該套集中空調(diào)系統(tǒng)不符合衛(wèi)生質(zhì)量要求：

a) 冷卻水或冷凝水中有嗜肺軍團(tuán)菌檢出的;

b) 新風(fēng)量檢測(cè)結(jié)果不符合表1要求的;

c) 單個(gè)風(fēng)口送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)、β一溶血性鏈球菌、嗜肺軍團(tuán)菌檢測(cè)結(jié)果有不符合表2要求的;

d) 抽取的各個(gè)風(fēng)口送風(fēng)中PM10的平均值不符合表2要求的;

e) 風(fēng)管內(nèi)表面積塵中細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)檢測(cè)結(jié)果有不符合表3要求的;

f) 風(fēng)管內(nèi)表面各采樣點(diǎn)積塵量檢測(cè)結(jié)果的平均值不符合表3要求的。

附錄A(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)系統(tǒng)新風(fēng)量檢測(cè)方法

A.1 總則

本附錄規(guī)定了用風(fēng)管法測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)的新風(fēng)量，即直接在新風(fēng)管上測(cè)定新風(fēng)量的方法。

A.2 原理

在機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)處于正常運(yùn)行或規(guī)定的工況條件下，通過(guò)測(cè)量新風(fēng)管某一斷面的面積及該斷面的平均風(fēng)速，計(jì)算出該斷面的新風(fēng)量。如果一套系統(tǒng)有多個(gè)新風(fēng)管，每個(gè)新風(fēng)管均要測(cè)定風(fēng)量，全部新風(fēng)管風(fēng)量之和即為該套系統(tǒng)的總新風(fēng)量，根據(jù)系統(tǒng)服務(wù)區(qū)域內(nèi)的人數(shù)，便可得出新風(fēng)量結(jié)果。

A.3 儀器

A.3.1 標(biāo)準(zhǔn)皮托管：Kp=0.99±0.01，或S型皮托管Kp=0.84±0.01。

A.3.2 微壓計(jì)：精確度不低于2%，最小讀數(shù)不大于1 Pa。

A.3.3 熱電風(fēng)速儀：最小讀數(shù)不大于0.1 m/s。

A.3.4 玻璃液體溫度計(jì)或電阻溫度計(jì)：最小讀數(shù)不大于1℃。

A.4 測(cè)點(diǎn)要求

A.4.1 檢測(cè)點(diǎn)所在的斷面應(yīng)選在氣流平穩(wěn)的直管段，避開彎頭和斷面急劇變化的部位。

A.4.2  圓形風(fēng)管測(cè)點(diǎn)位置和數(shù)量：將風(fēng)管分成適當(dāng)數(shù)量的等面積同心環(huán)，測(cè)點(diǎn)選在各環(huán)面積中心線與垂直的兩條直徑線的交點(diǎn)上，圓形風(fēng)管測(cè)點(diǎn)數(shù)見表A.1。直徑小于0.3  m、流速分布比較均勻的風(fēng)管，可取風(fēng)管中心一點(diǎn)作為測(cè)點(diǎn)。氣流分布對(duì)稱和比較均勻的風(fēng)管，可只取一個(gè)方向的測(cè)點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。

A.4.3 矩形風(fēng)管測(cè)點(diǎn)位置和數(shù)量：將風(fēng)管斷面分成適當(dāng)數(shù)量的等面積矩形(最好為正方形).各矩形中心即為測(cè)點(diǎn)。矩形風(fēng)管測(cè)點(diǎn)數(shù)見表A.2。

A.5 測(cè)量步驟

A.5.1 測(cè)量風(fēng)管檢測(cè)斷面面積(F).按表A.1或表A.2分環(huán)(分塊)確定檢測(cè)點(diǎn)。

A.5.2 皮托管法測(cè)定新風(fēng)量測(cè)量步驟如下：

a) 檢查微壓汁顯示是否正常，微壓計(jì)與皮托管連接是否漏氣;

b) 將皮托管全壓出口與微壓計(jì)正壓端連接，靜壓管出口與微壓計(jì)負(fù)壓端連接;

c) 將皮托管插入風(fēng)管內(nèi)，在各測(cè)點(diǎn)上使皮托管的全壓測(cè)孔對(duì)著氣流方向，偏差不得超過(guò)10°，測(cè)量出各點(diǎn)動(dòng)壓( Pd)。重復(fù)測(cè)量一次，取算術(shù)平均值;

d) 將玻璃液體溫度計(jì)或電阻溫度計(jì)插入風(fēng)管中心點(diǎn)處，封閉測(cè)孑L待溫度穩(wěn)定后讀數(shù)，測(cè)量出新風(fēng)溫度(t);

e) 調(diào)查機(jī)械通風(fēng)服務(wù)區(qū)域內(nèi)設(shè)計(jì)人流量和實(shí)際最大人流量。

A.5.3 風(fēng)速計(jì)法測(cè)定新風(fēng)量測(cè)量步驟如下：

a) 按照熱電風(fēng)速儀使用說(shuō)明書調(diào)整儀器;

b) 將風(fēng)速儀放入新風(fēng)管內(nèi)測(cè)量各測(cè)點(diǎn)風(fēng)速，以全部測(cè)點(diǎn)風(fēng)速算術(shù)平均值作為平均風(fēng)速;

c) 將玻璃液體溫度計(jì)或電阻溫度計(jì)插入風(fēng)管中心點(diǎn)處，封閉測(cè)孔待溫度穩(wěn)定后讀數(shù)，測(cè)量出新風(fēng)溫度(t);

d) 調(diào)查機(jī)械通風(fēng)服務(wù)區(qū)域內(nèi)設(shè)計(jì)人流量和實(shí)際最大人流量。

A.5.4 按要求對(duì)儀器進(jìn)行期間核查和使用前校準(zhǔn)。

A.6 結(jié)果計(jì)算

A.6.1 皮托管法測(cè)量新風(fēng)量的計(jì)算見式(A.1)：

式中：

Q-新風(fēng)量，單位為立方米每人小時(shí)[m3/(h·人)];

F-新風(fēng)管測(cè)量斷面面積，單位為平方米(m2);

Kp——皮托管系數(shù);

t——新風(fēng)溫度，單位為攝氏度(℃);

Pd -新風(fēng)動(dòng)壓值，單位為帕(pa);

n——一個(gè)機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)內(nèi)新風(fēng)管的數(shù)量;

P-服務(wù)區(qū)人數(shù)，取設(shè)計(jì)人流量與實(shí)際最大人流量2個(gè)數(shù)中的高值，單位為人。

A.6.2風(fēng)速汁法測(cè)量新風(fēng)量的計(jì)算見式(A.2)：

式中：

Q-新風(fēng)量，單位為立方米每人小時(shí)[m3/(人·h)];

F-新風(fēng)管測(cè)量斷面面積，單位為平方米(m2);

V-新風(fēng)管中空氣的平均速度，單位為米每秒(m/s);

n-一個(gè)系統(tǒng)內(nèi)新風(fēng)管的數(shù)量;

P-服務(wù)區(qū)人數(shù)，取設(shè)計(jì)人流量與實(shí)際最大人流量2個(gè)數(shù)中的高值，單位為人。

A.6.3 換氣次數(shù)的計(jì)算見式(A.3)

式中：

A-換氣次數(shù)，單位為次每小時(shí)(次/h);

Q-新風(fēng)量，單位為立方米每人小時(shí)[m3/(人·h)];

P-服務(wù)區(qū)人數(shù);

V-室內(nèi)空氣體積，單位為立方米(m3)。

A.7 測(cè)量范圍

皮托管法測(cè)量新風(fēng)管風(fēng)速范圍為2 m/s--30 m/s，電風(fēng)速計(jì)法測(cè)量新風(fēng)管風(fēng)速范圍為0.1 m/s～10 m/s。

附 錄B(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團(tuán)菌檢驗(yàn)方法

B.1 總則

本附錄規(guī)定了用培養(yǎng)法定性測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水及其形成的沉積物、軟泥等樣品中的嗜肺軍團(tuán)菌，其他洗浴水、溫泉水、景觀水等樣品中的嗜肺軍團(tuán)菌測(cè)定可參照?qǐng)?zhí)行。

B.2 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本方法。

B.2.1

嗜肺軍團(tuán)菌 legionella pneumophila

樣品經(jīng)培養(yǎng)在GVPC瓊脂平板上生成典型菌落，并在BCYE瓊脂平板上生長(zhǎng)而在L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板不生長(zhǎng)，進(jìn)一步經(jīng)生化實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)實(shí)驗(yàn)鑒定確認(rèn)的菌落。

B.3 儀器和設(shè)備

B.3.1 平皿：Φ90 mm。

B.3.2 CO2培養(yǎng)箱：35℃～37℃。

B.3.3 紫外燈：波長(zhǎng)360 nm±2 nm。

B.3.4 濾膜過(guò)濾器。

B.3.5 濾膜：孔徑0. 22 μm~0. 45 μm。

B.3.6 真空泵。

B.3.7 離心機(jī)。

B.3.8 渦旋振蕩器。

B.3.9 普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡。

B.3. 10 水浴箱。

B.3. 11 廣口采樣瓶：玻璃或聚乙烯材料，磨口，容積500 mL。

B.4 培養(yǎng)基和試劑

B.4,1 GVPC瓊脂平板。

B.4.2 BCYE瓊脂平板。

B.4.3 BCYE-CYE瓊脂平板。

B.4.4 革蘭氏染色液。

B.4.5 馬尿酸鹽生化反應(yīng)管。

B.4.6 軍團(tuán)菌分型血清試劑。

B.5 采樣

B.5.1 將廣口采樣瓶(B.3.11)用前滅菌。

B.5.2 每瓶中加入Na2S203溶液(c=0.1 mol/L)O.3 ml_～0.5 mL，中和樣品中的氧化物。

B.5.3 水樣采集位置：冷卻水采樣點(diǎn)設(shè)置在距塔壁20 cm、液面下10 cm處，冷凝水采樣點(diǎn)設(shè)置在排水管或冷凝水盤處。

B.5.4 每個(gè)采樣點(diǎn)依無(wú)菌操作取水樣約500 mL。

B.5.5 采集的樣品2d內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，不必冷凍，但要避光和防止受熱，室溫下貯存不得超過(guò)15 d。

B.6 檢驗(yàn)步驟

B.6.1 樣品的沉淀或離心：如有雜質(zhì)可靜置沉淀或1000 r/min離心1 min去除。

B.6.2 樣品的過(guò)濾：將經(jīng)沉淀或離心的樣品通過(guò)濾膜(B.3.5)過(guò)濾，取下濾膜置于15 mL滅菌水中，充分洗脫，備用。

B.6.3 樣品的熱處理：取1 mL洗脫樣品，置50℃水浴(B.3.10)加熱30 min。

B.6.4 樣品的酸處理：取5 mL洗脫樣品，調(diào)pH至2.2，輕輕搖勻，放置5 mm。

B.6.5 樣品的接種：取洗脫樣品(B.6.2)、熱處理樣品(B.6.3)及酸處理樣品(B.6.4)各0. 1  mL，分別接種GVPC平板(B.4.1)。

B.6.6 樣品的培養(yǎng)：將接種平板靜置于CO2培蕎箱(B.3.2)中，溫度為35℃-37℃，CO：濃度為2.  5%。無(wú)CO2培養(yǎng)箱可采用燭缸培養(yǎng)法。觀察到有培養(yǎng)物生成時(shí)，反轉(zhuǎn)平板，孵育10 d，注意保濕。

B.6.7  菌落觀察：軍團(tuán)菌生長(zhǎng)緩慢，易被其他菌掩蓋，從孵育第3天開始每天在顯微鏡(B.3.9)上觀察。軍團(tuán)菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍(lán)色或紫色，也能顯深褐色、灰綠色、深紅色;菌落整齊，表面光滑，呈典型毛玻璃狀，在紫外燈下，部分菌落有熒光。

B.6.8  菌落驗(yàn)證：從平皿上挑取2個(gè)可疑菌落，接種BCYE瓊脂平板(B.4.2)和L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板(B.4.3)，35℃～37℃培養(yǎng)2  d，凡在BCYE瓊脂平板上生長(zhǎng)而在L一半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板不生長(zhǎng)的則為軍團(tuán)菌菌落。

B.6.9  菌型確定：應(yīng)進(jìn)行生化培養(yǎng)與血清學(xué)實(shí)驗(yàn)確定嗜肺軍團(tuán)菌。生化培養(yǎng)：氧化酶(-/弱+)，硝酸鹽還原(-)，尿素酶(-)，明膠液化(+).水解馬尿酸。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：用嗜肺軍團(tuán)菌診斷血清進(jìn)行分型。

附錄C(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)送風(fēng)中可吸入顆粒物(PM10)檢測(cè)方法

C.1 總則

本附錄規(guī)定了用光散射式粉塵儀測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中可吸入顆粒物PM10的質(zhì)量濃度，測(cè)量范圍0.001 mg/m3—10 mg/m3。

C.2 原理

當(dāng)光照射在空氣中懸浮的顆粒物上時(shí)，產(chǎn)生散射光。在顆粒物性質(zhì)一定的條件下，顆粒物的散射光強(qiáng)度與其質(zhì)量濃度成正比。通過(guò)測(cè)量散射光強(qiáng)度，應(yīng)用質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換系數(shù)K值，求得顆粒物質(zhì)量濃度。

C.3 儀器

顆粒物捕集性能：捕集效率為50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的顆粒物空氣動(dòng)力學(xué)直徑Da50為10  μm±o.5μm，捕集效率曲線的幾何標(biāo)準(zhǔn)差仃δg為1.5±0.1。

測(cè)量靈敏度：對(duì)于校正粒子，儀器1個(gè)計(jì)數(shù)/min=0.001 mg/m3。

測(cè)量相對(duì)誤差：對(duì)于校正粒子測(cè)量相對(duì)誤差小于士10%。

測(cè)量范圍：0.001 mg/m3～10 mg/m3以上。

儀器應(yīng)內(nèi)設(shè)出廠前已標(biāo)定的具有光學(xué)穩(wěn)定性的自校裝置。

注：校正粒子為平均粒徑0.6 μm，幾何標(biāo)準(zhǔn)偏差δ<1. 25的聚苯乙烯粒子。

C.4 測(cè)量步驟

C.4.1 檢測(cè)點(diǎn)數(shù)量與位置

C.4.1.1 每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個(gè)～5個(gè)送風(fēng)口進(jìn)行檢測(cè)。送風(fēng)口面積小于0.1 m2的設(shè)置1個(gè)檢測(cè)點(diǎn)，送風(fēng)口面積在0.1  m2以上的設(shè)置3個(gè)檢測(cè)點(diǎn)。

C.4.1.2風(fēng)口設(shè)置1個(gè)檢測(cè)點(diǎn)的在送風(fēng)口中心布置，設(shè)置3個(gè)檢測(cè)點(diǎn)的在送風(fēng)口對(duì)角線四等分的3個(gè)等分點(diǎn)上布點(diǎn)。

C.4.1.3檢測(cè)點(diǎn)位于送風(fēng)口散流器下風(fēng)方向15 cm～20 cm處。

C.4.2 檢測(cè)時(shí)間與頻次

C.4.2.1 應(yīng)在集中空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)條件下進(jìn)行檢測(cè)。

C.4.2.2每個(gè)檢測(cè)點(diǎn)檢測(cè)3次。

C.4.3 儀器操作

C.4.3.1 對(duì)粉塵儀光學(xué)系統(tǒng)進(jìn)行自校準(zhǔn)。

C.4.3.2 根據(jù)送風(fēng)中PM10濃度、儀器靈敏度、儀器測(cè)定范圍確定儀器測(cè)定時(shí)間。

C.4.3.3按使用說(shuō)明書操作儀器。

C.5 結(jié)果計(jì)算

C.5.1 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換

對(duì)于非質(zhì)量濃度的汁數(shù)值，按式(C.1)轉(zhuǎn)換為PM10質(zhì)量濃度：

式中：

c-可吸人顆粒物PM10的質(zhì)量濃度，單位為毫克每立方米(mg/m3);

R-儀器每分鐘計(jì)數(shù)值，單位為個(gè)每分鐘(個(gè)/min);

K-質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換系數(shù)。

C.5.2 送風(fēng)口PM10濃度計(jì)算

第是個(gè)送風(fēng)口PM10的質(zhì)量濃度(ck)按式(C.2)計(jì)算：

式中：

cij -第j個(gè)測(cè)點(diǎn)、第i次檢測(cè)值;

n——測(cè)點(diǎn)個(gè)數(shù)。

C.5.3 集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中PM10濃度測(cè)定結(jié)果

一個(gè)系統(tǒng)(a)送風(fēng)中PM10的測(cè)定結(jié)果(Ca)按該系統(tǒng)全部檢測(cè)的送風(fēng)口PM10質(zhì)量濃度(Ck)的算術(shù)平均值給出。

附錄D(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)檢驗(yàn)方法

D.1 總則

本附錄規(guī)定了用培養(yǎng)法測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中的細(xì)菌總數(shù)。

D.2 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本方法。

D.2.1

細(xì)菌總數(shù) total bacterial count

集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中采集的樣品，計(jì)數(shù)在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)35℃～37℃、48 h培養(yǎng)所生長(zhǎng)發(fā)育的嗜中溫性需氧和兼性厭氧菌落的總數(shù)。

D.3 儀器和設(shè)備

D.3.1 六級(jí)篩孔撞擊式微生物采樣器。

D.3.2 高壓蒸汽滅菌器。

D.3.3 恒溫培養(yǎng)箱。

D.3.4 平皿：Φ90 mm。

D.4 培養(yǎng)基

D.4.1 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基成分：

蛋白胨 10 g

氯化鈉 5g

肉膏 5g

瓊脂 20 g

蒸餾水 1000 mL

D.4.2 制法：將蛋白胨、氯化鈉、肉膏溶于蒸餾水中，校正pH為7.2～7.6，加入瓊脂,121℃，20 min滅菌備用。

D.5 采樣

D.5.1 采樣點(diǎn)：每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個(gè)～5個(gè)送風(fēng)口進(jìn)行檢測(cè).每個(gè)風(fēng)口設(shè)置1個(gè)檢測(cè)點(diǎn)，一般設(shè)在送風(fēng)口下方15 cm～20 cm、水平方向向外50  cm~100 cm處。

D.5.2采樣環(huán)境條件：采樣時(shí)集中空凋系統(tǒng)必須在正常運(yùn)轉(zhuǎn)條件下.并關(guān)閉門窗15 min～30  min以上，盡量減少人員活動(dòng)幅度與頻率.記錄室內(nèi)人員數(shù)量、溫濕度與天氣狀況等，

D.5.3 采樣方法：以無(wú)菌操作，使用撞擊式微生物采樣器(D.3.1)以28.3 L/min流量采集5 min-15 min。

D.6 檢驗(yàn)步驟

將采集細(xì)菌后的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿置35℃～37℃培養(yǎng)48 h，菌落計(jì)數(shù)。

D.7 結(jié)果報(bào)告

D.7.1 送風(fēng)口細(xì)菌總數(shù)測(cè)定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與采氣體積換算成CFU/m3(空氣中菌落形成單位每立方米)。

D.7.2集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定結(jié)果：一個(gè)系統(tǒng)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測(cè)的送風(fēng)口細(xì)菌總數(shù)測(cè)定值中的最大值給出。

附錄E(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)送風(fēng)中真菌總數(shù)檢驗(yàn)方法

E.1 總則

本附錄規(guī)定了用培養(yǎng)法測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中的真菌總數(shù)。

E.2 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本方法。

E.2.1

真菌總數(shù) total fungi count

集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中采集的樣品，計(jì)數(shù)在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)28℃、5 d培養(yǎng)所形成的菌落數(shù)。

E.3 儀器和設(shè)備

見D.3。

E.4 培養(yǎng)基

E.4.1 沙氏瓊脂培養(yǎng)基成分：

蛋白胨 10 g

葡萄糖 40 g

瓊脂 20 g

蒸餾水 1 000 mL

E.4.2制法：將蛋白胨、葡萄糖溶于蒸餾水中，校正pH為5.5～6.0，加入瓊脂，115℃，15 min滅菌備用。

E.5 采樣

見D.5。

E.6 檢驗(yàn)步驟

將采集真菌后的沙氏瓊脂培養(yǎng)基平皿置28℃培養(yǎng)5d，逐日觀察并于第5天記錄結(jié)果。若真菌數(shù)量過(guò)多可于第3天計(jì)數(shù)結(jié)果，并記錄培養(yǎng)時(shí)間。

E.7 結(jié)果報(bào)告

E.7.1 送風(fēng)口真菌總數(shù)測(cè)定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與采氣體積換算成CFU/m3(空氣中菌落形成單位每立方米)。

E.7.2集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中真菌總數(shù)測(cè)定結(jié)果：一個(gè)系統(tǒng)送風(fēng)中真菌總數(shù)的測(cè)定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測(cè)的送風(fēng)口真菌總數(shù)測(cè)定值中的最大值給出。

附錄F(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)送風(fēng)中β-溶血性鏈球菌檢驗(yàn)方法

F.1 總則

本附錄規(guī)定了用培養(yǎng)法測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中的β一溶血性鏈球菌。

F.2 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本方法。

F.2.1

β一溶血性鏈球菌 β-hemolytic streptococcus

集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中采集的樣品，經(jīng)35℃～37℃、24 h～48 h培養(yǎng)，在血瓊脂平板上形成的典型菌落。

F.3 儀器和設(shè)備

見D.3。

F.4 培養(yǎng)基

F.4.1 血瓊脂平板成分：

蛋白胨 10 g

氯化鈉 5g

瓊脂 20 g

脫纖維羊血 5 mL～10 mL

蒸餾水 1000 mL

F.4.2制法：將蛋白胨、氯化鈉、肉膏加熱溶化于蒸餾水中，校正pH為7.4～7.6，加入瓊脂，121℃20  min滅菌。待冷卻至50℃左右，以無(wú)菌操作加入脫纖維羊血，搖勻傾皿。

F.5 采樣

見D.5。

F.6 檢驗(yàn)步驟

F.6.1 培養(yǎng)方法：采樣后的血瓊脂平板在35℃～37℃下培養(yǎng)24 h～48 h。

F.6.2 結(jié)果觀察：培養(yǎng)后，在血瓊脂平板上形成呈灰白色、表面突起、直徑0.5 mm~0.7  mm的細(xì)小菌落，菌落透明或半透明，表面光滑有乳光;鏡檢為革藍(lán)氏陽(yáng)性無(wú)芽孢球菌，圓形或卵圓形，呈鏈狀排列，受培養(yǎng)與操作條件影響鏈的長(zhǎng)度在4個(gè)~8個(gè)細(xì)胞至幾十個(gè)細(xì)胞之間;菌落周圍有明顯的2  mm～4 mm界限分明、完全透明的無(wú)色溶血環(huán)。符合上述特征的菌落為β溶血性鏈球菌：

F.7 結(jié)果報(bào)告

F.7.1 送風(fēng)口β一溶血性鏈球菌測(cè)定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與采氣體積換算成CFU/m3(空氣中菌落形成單位每立方米)。

F.7.2  集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中β一溶血性鏈球菌測(cè)定結(jié)果：一個(gè)系統(tǒng)送風(fēng)中β一溶血性鏈球菌的測(cè)定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢測(cè)的送風(fēng)口β一溶血性鏈球菌測(cè)定值中的最大值給出。

附錄G(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團(tuán)菌檢驗(yàn)方法

G.1 總則

本附錄規(guī)定了用液體沖擊法測(cè)定集中空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中的嗜肺軍團(tuán)菌。

G.2 術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本方法。

G.2.1

嗜肺軍團(tuán)菌 legionella pneumophila

樣品經(jīng)培養(yǎng)在GVPG瓊脂平板上生成典型菌落，并在BCYE瓊脂平板上生長(zhǎng)而在L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板不生長(zhǎng)，進(jìn)一步經(jīng)生化實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)實(shí)驗(yàn)鑒定確認(rèn)的菌落。

G.3 儀器和設(shè)備

G.3.1 微生物氣溶膠濃縮器：采樣流量≥100 L/min.，對(duì)于直徑3.0μm以上粒子其捕集效率≥80%或濃縮比≥8。

G.3.2 液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器：采樣流量7 L/min-15 L/min.，對(duì)于0.5μm粒子的捕集效率≥90%。

G.3.3 離心管：容積50 mL。

G.3.4 平皿：Φ90 mm。

G.3.5 CO2培養(yǎng)箱：35℃～37℃。

G.3.6 紫外燈：波長(zhǎng)360 nm±2 nm。

G.3.7 渦旋振蕩器。

G.3.8 普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡。

G.3.9 水浴箱。

G.4 試劑和培養(yǎng)基

G.4.1 采樣吸收液1-GVPC液體培養(yǎng)基

G.4.1.1 GVPC添加劑成分：

多粘菌素B硫酸鹽 10 mg

萬(wàn)古霉素 0.5 mg

放線菌酮 80 mg

G.4.1.2 BCYE添加劑成分：

α一酮戊二酸 1.0 g

N-2酰胺基一2胺基乙烷磺酸(ACES) 10.0 g

氫氧化鉀 2. 88 g

L-半胱氨酸鹽酸鹽 0.4 g

焦磷酸鐵 0. 25 g

G.4.1.3 吸收液成分：

活性碳 2g

酵母浸出粉 10 g

GVPC添加劑 見G.4.1.1

BCYE添加劑 見G.4.1.2

蒸餾水 1000 mL

G.4.1.4制法：將活性碳、酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高壓滅菌15  min，加入GVPC添加劑(G.4.1.1)和BCYE添加劑(G.4.1.2)，分裝于滅菌后的離心管(G.3.3)中備用。

G.4.2 采樣吸收液2-酵母提取液

G.4.2.1 吸收液成分：

酵母浸出粉 12 g

蒸餾水 1 000 mL

G.4.2.2制法：將酵母浸出粉加水至1 000 mL，121℃下高壓滅菌15 min，分裝于滅菌后的離心管(G.3.3)中備用。

G.4.3 鹽酸氯化鉀溶液[c(HCI·KCI) =0. 01 mol/L]

G.4.3.1成分：

鹽酸(0.2 mol/L) 3.9 ml_,

氯化鉀(0.2 mol/L) 20 mL

G.4.3.2制法：將上述成分混合，用1mol/L)氫氧化鈉調(diào)整pH=2.2±0.2，121℃下高壓滅菌15 min備用。

G.4.4 其他試劑

G.4.4.1 GVPC瓊脂平板。

G.4.4.2 BCYE瓊脂平板。

G.4.4.3 BCYE-CYE瓊脂平板。

G.4.4.4 革蘭氏染色液。

G.4.4.5 馬尿酸鹽生化反應(yīng)管。

G.4.4.6 軍團(tuán)菌分型血清試劑。

G.5 采樣

G.5.1 采樣點(diǎn)：每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個(gè)～5個(gè)送風(fēng)口進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)風(fēng)口設(shè)置1個(gè)測(cè)點(diǎn)，一般設(shè)在送風(fēng)口下方15 cm～20 cm、水平方向向外50  cm～100 cm處。

G.5.2 將采樣吸收液1(G.4.1)20 mL倒入微生物氣溶膠采樣器(G.3.2)中，然后用吸管加入礦物油1滴～2滴。

G.5.3  將微生物氣溶膠濃縮器(G.3.1)與微生物氣溶膠采樣器(G.3.2)連接，按照微生物氣溶膠濃縮器和微生物氣溶膠采樣器的流量要求調(diào)整主流量和濃縮流量。

G.5.4 按濃縮器和采樣器說(shuō)明書操作，每個(gè)氣溶膠樣品采集空氣量1 m3～2 m3。

G.5.5 將采樣吸收液2(G.4.2)20 mL倒入微生物氣溶膠采樣器((G.3.2)中，然后用吸管加入礦物油1滴～2滴;在相同采樣點(diǎn)重復(fù)G.5.  3-G..5.4步驟。

G.5.6 采集的樣品不必冷凍，但要避光和防止受熱，4 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。

G.6 檢驗(yàn)步驟

G.6.1 樣品的酸處理：對(duì)采樣后的吸收液1(G.4.1)和吸收液2(G.4.2)原液各取1  mL.分別加入鹽酸氯化鉀溶液(G.4.3)充分混合，調(diào)pH至2.2.靜置15 min。

G.6.2 樣品的接種：在酸處理后的2種樣品(G.6.1)中分別加入1 mol/L氫氧化鉀溶液，中和至pH為6.9，各取懸液0.2 mL～O.3  mL分別接種GVPC平板(G.4.4)。

G.6.3 樣品的培養(yǎng)：將接種平板靜置于濃度為5%、溫度為35℃～37℃的CO2培養(yǎng)箱(G.3.5)中，孵育10 d。

G.6.4  菌落觀察：從孵育第3天開始觀察菌落。軍團(tuán)菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍(lán)色或紫色，也能顯深褐色、灰綠色、深紅色;菌落整齊，表面光滑，呈典型毛玻璃狀，在紫外燈下，部分菌落有熒光。

G.6.5  菌落驗(yàn)證：從平皿上挑取2個(gè)可疑菌落，接種BCYE瓊脂平板(G.4.5)和L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板(G.4.6)，35℃～37℃培養(yǎng)2d，凡在BCYE瓊脂平板上生長(zhǎng)而在L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板不生長(zhǎng)的則為軍團(tuán)菌菌落。

G.6.6  菌型確定：應(yīng)進(jìn)行生化培養(yǎng)與血清學(xué)實(shí)驗(yàn)確定嗜肺軍團(tuán)菌。生化培養(yǎng)：氧化酶(-/弱+)，硝酸鹽還原(-)，尿素酶(-)，明膠液化(+).水解馬尿酸。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：用嗜肺軍團(tuán)菌診斷血清進(jìn)行分型。

G.7 結(jié)果報(bào)告

G.7.1 采樣點(diǎn)測(cè)定結(jié)果：兩種采樣吸收液中至少有一種吸收液培養(yǎng)出嗜肺軍團(tuán)菌，即為該采樣點(diǎn)嗜肺軍團(tuán)菌陽(yáng)性。

G.7.2 一套系統(tǒng)測(cè)定結(jié)果：一套系統(tǒng)中任意一個(gè)采樣點(diǎn)嗜肺軍團(tuán)菌檢測(cè)陽(yáng)性，即該空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中嗜肺軍團(tuán)菌的測(cè)定結(jié)果為陽(yáng)性。

附錄H(規(guī)范性附錄)集中空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面積塵量檢驗(yàn)方法